濃縮メディアのペトリ皿の準備は、微生物学の基本的なスキルであり、さまざまな微生物を栽培して研究するために不可欠です。ペトリ料理のサプライヤーとして、私は高品質の製品を提供し、関連する知識を共有することの重要性を理解しています。このブログでは、濃縮メディアのペトリ料理を段階的に準備するプロセスをご案内します。
濃縮メディアの理解
濃縮媒体は、他の微生物の成長を抑制しながら、特定の微生物の成長を促進するために策定されています。それらには、栄養素、成長因子、および標的生物を支持する選択剤が含まれています。たとえば、特定のアミノ酸を必要とする特定の細菌株を分離することに興味がある場合、濃縮媒体にそのアミノ酸が補完されます。
必要な材料
- ペトリ料理：高品質のペトリ料理は、栽培を成功させるために重要です。幅広い範囲を提供しています実験用ガラス90mm 100mm 120mmガラスペトリ皿付きのグラスペトリ皿そしてラボガラスペトリ料理60mm 90mm 100mmセル培養皿蓋付きプレミアムガラスから作られ、最適な透明性と耐久性を確保します。
- 濃縮メディア：ターゲット微生物によっては、適切な濃縮メディアを選択する必要があります。事前に作成されたメディアを購入するか、個々のコンポーネントを使用してゼロから準備することができます。
- オートクレーブ：これは、汚染を防ぐためにメディアとペトリ皿を滅菌するために使用されます。
- ピペットとヒント：メディアとサンプルの正確な測定と転送のため。
- Bunsenバーナーまたは熱源：プロセス中にピペットやその他のツールを滅菌する。
- 滅菌ワークベンチまたはラミナーフローフード：作業中に滅菌環境を維持する。
ステップ - by-ステップ準備
1。濃縮メディアを準備します
- コンポーネントの重量：メディアをゼロから作っている場合は、レシピに従って各コンポーネントの重量を慎重に検討してください。清潔で較正されたバランスを使用してください。たとえば、培地が10グラムのペプトン、酵母抽出物5グラム、塩化ナトリウム2グラムを必要とする場合、これらの量を正確に測定します。
- コンポーネントを溶解します：計量したコンポーネントをきれいなフラスコまたはビーカーに移します。蒸留水をフラスコに加え、すべてのコンポーネントが完全に溶解するまで、磁気炒め物またはガラス棒を使用して静かにかき混ぜます。必要に応じて混合物をわずかに加熱しますが、過熱を避けてください。
- pHを調整します：pHメーターを使用して、メディアのpHを測定します。ほとんどの微生物は、特定のpH範囲内で最もよく成長します。たとえば、多くの細菌は、7.2〜7.4前後のわずかにアルカリ性のpHを好みます。必要に応じて、少量の酸またはベースを追加してpHを調整します。
- 選択剤を追加する（該当する場合）：濃縮媒体が特定の微生物のグループを選択するように設計されている場合、この段階で適切な選択剤を追加します。たとえば、ネガティブバクテリアを隔離しようとしている場合は、クリスタルバイオレットまたは胆汁塩を追加して、グラムの成長を阻害する可能性があります。
2。メディアを滅菌します
- オートクレーブ：準備されたメディアをネジ型ボトルやフラスコなどの適切な容器に移します。キャップをわずかに緩めて、オートクレーブ中に蒸気が逃げることができます。コンテナをオートクレーブに配置し、適切なパラメーターを設定します。一般的に、メディアは完全な滅菌を確保するために、121°Cで15〜20分間オートクレーブされます。
- 冷却：オートクレーブ後、オートクレーブから容器を慎重に取り外し、約50〜55°Cに冷却できるようにします。この温度は、後で微生物に熱損傷を与えることなく、メディアをペトリ皿に注ぐのに最適です。
3。ペトリ皿を準備します
- 殺菌：ガラスのペトリ皿を使用している場合は、滅菌する必要があります。ただし、2倍にすることは良い習慣です。チェックしてください。必要に応じて、ペトリ皿をオートクレーブに121°Cで15〜20分間置くことができます。
- 滅菌ワークスペースをセットアップします：層流のフードや滅菌ワークベンチなど、無菌環境で作業します。ワークスペースを消毒剤で掃除し、少なくとも15分間UV光をオンにしてから、空中の汚染物質を殺します。
4.メディアをペトリ皿に注ぎます
- 容器の首を炎：Bunsenバーナーを使用して、冷却された媒体を保持している容器の首を静かに炎上させます。これにより、汚染物質がメディアを注ぐときにメディアに入るのを防ぐのに役立ちます。
- メディアを注ぎます：ペトリ皿の蓋を少し開けて、メディアを皿に注ぎます。厚さ約3〜5 mmのメディアの層で皿の底を均等に覆うことを目指します。皿の外にメディアをこぼさないように注意してください。
- メディアが固まることを許可します：メディアが注がれたら、蓋をペトリ皿に戻し、メディアが固まるまで邪魔されずに座らせます。これは通常、メディアの種類に応じて約15〜30分かかります。
5.ペトリ皿にラベルを付けて保管します
- ラベリング：恒久的なマーカーを使用して、ペトリ皿にメディアの種類、準備日、およびターゲット微生物などの関連情報をラベル付けします。
- ストレージ：準備されたペトリ皿を涼しく暗い場所に保管してください。皿を慎重に積み重ねてスペースを節約できます。すぐに皿を使用していない場合は、4°Cの冷蔵庫に保管して保存期間を延長できます。
トラブルシューティング
- 汚染：真菌の成長や媒体上の異常なコロニーなど、汚染の兆候に気付いた場合、影響を受けたペトリ皿を捨ててください。次回は、滅菌技術を確認し、より不毛の環境で作業してください。
- メディアは固化していません：これは、コンポーネントの誤った比率または不十分なオートクレーブが原因である可能性があります。レシピを確認し、オートクレーブの指示に正しく従っていることを確認してください。
- 不均一なメディア分布：メディアがペトリ皿に均等に配布されていない場合、それはメディアを注ぐときに皿が水平ではなかったためかもしれません。注ぎプロセス中に皿を平らな表面に置いてください。
結論
濃縮メディアのペトリ皿の準備は、詳細であるがやりがいのあるプロセスです。上記のステップに従って、供給から高品質のペトリ皿を使用することにより、微生物を栽培して研究するための理想的な環境を作成できます。あなたが研究室の研究者であろうと、微生物学のクラスの学生であろうと、自宅で微生物文化に興味がある人であろうと、適切なツールと知識を持っていることが不可欠です。
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参照
- Atlas、RM（2010）。微生物メディアのハンドブック。 CRCプレス。
- Pelczar、MJ、Chan、ECS、Krieg、NR（2007）。微生物学：概念とアプリケーション。マクグロー - ヒル。